روش اندازه گیری پرولین در برگ  به روش Bates و همکاران (1973)، با اندکی تغییر. بدین منظور 100 میلی گرم از بافت تازه در 5 میلی لیتر اتانول 40% کاملاً عصاره گیری شده و سپس توسط کاغذ واتمن شماره 2 در لوله آزمایش صاف می شود. یک میلی لیتر از عصاره درون ارلن 25 میلی لیتری ریخته شده و به آنها یک میلی لیترمحلول ناین هیدرین اضافه گردید. ارلن ها به مدت یک ساعت به آون با دمای 100 درجه سانتیگراد منتقل می شود و سپس روی یخ(براي راحت ي كار آن در بالاي يخچال روي يك روزنامه قرار دهيد) قرار می گیرد. بعد از سرد شدن، به ارلن ها 10 میلی لیتر تولوئن اضافه و محتویات ارلن ها به لوله آزمایش منتقل می شوند. هر لوله آزمایش قبل از قرائت مدت 15 ثانیه روی شیکر قرار گرفته و سپس مایع رویی به کووت دستگاه اسپکتروفتومتر (Shimidzu UV-12-20)، منتقل شده  و در طول موج 520 نانومتر قرائت صورت می گیرد. از محلول غلظت های مختلف پرولین (SIGMA™ - USA) جهت رسم نمودار استاندارد استفاده می شود و اعداد قرائت شده با استفاده از منحنی به میکرومول پرولین در گرم بافت تازه تبدیل می شوند.

25/1 گرم ناين هيدرين+اسيد فسفريك 6 مولار(2/8 اسيد فسفريك+8/11 آب مقطر)+ 30 سي سي اسيد استيك گلي شيال= محلول ناين هيدرين(( اين محلول تا 24 ساعت قابل نگهداري است)).